免疫組織化學（Immunohisochemistry）檢測技術(shù)曾被公認為病理學發(fā)展史上的第二個里程碑，此項技術(shù)發(fā)展到現(xiàn)在，較好充實了病理學的內(nèi)容，使病理診斷結(jié)果更精確，將病理學提高到了形態(tài)和功能相結(jié)合的水平。免疫組織化學方法的敏感性和特異性直接影響診斷結(jié)果的準確性。近兩年來，在本科同志的配合下，筆者已做免疫組化420例，取得了很好的效果，并且明顯的提高了診斷結(jié)果的準確性，支持了對臨床病人的診療?，F(xiàn)提出以下五點供同道借鑒融享生物專注于病理實驗 免疫熒光,HE染色服務(wù)實驗如果你有需要可以找融享生物。山東免疫學免疫組化檢測

免疫膠體金技術(shù)

免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白，對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對組織或細胞內(nèi)的抗原進行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標記或多標記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。

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基本原理編輯

抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性，免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質(zhì)提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來，以期達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性，定位或定量的研究。分類編輯

免疫組織化學技術(shù)按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。

免疫熒光方法

是較好早建立的免疫組織化學技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強、靈敏度高、快速簡便，所以在臨床病理診斷、檢驗中應(yīng)用較廣。2）免疫酶標方法

免疫酶標方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜擞浀目贵w與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術(shù)是較好常用的技術(shù)。該方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點是：定位準確，對比度好，染色標本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標記方法，且隨著方法的不斷改進和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來越方便。在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測系統(tǒng)等。

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    ——90年代分子雜交技術(shù)、原位雜交技術(shù)、免疫細胞化學分類方法迅速發(fā)展。——2000年各種免疫組化技術(shù)更加成熟，使免疫組化技術(shù)成為當今生物醫(yī)學中形態(tài)、功能代謝綜合研究的一項有力工具。其應(yīng)用范圍深達醫(yī)學各個學科，是目前生命科學工作者應(yīng)該掌握的基本技術(shù)之一。免疫組化技術(shù)技術(shù)分類（1）根據(jù)染色方式分成：①貼片染色②漂浮染色（2）根據(jù)Ag—Ab結(jié)合方式分成：①直接法②間接法③多層法（3）按標記物的性質(zhì)分成：①免疫熒光技術(shù)（免疫熒光法）②免疫酶技術(shù)（酶標抗體法、橋法、PAD法、ABC法）③免疫金屬技術(shù)（免疫鐵蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法）免疫組化技術(shù)標記物（1）必要性：組織細胞內(nèi)Ag—Ab結(jié)合反應(yīng)一般是不可見的，若在鏡下檢測，則必須具有可視性標記物。（2）常用標記物①熒光素：較常用的是異硫一氰酸熒光素（Fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）——熒光顯微鏡下呈綠色熒光四乙基羅達明（rho—damineRB200）——熒光顯微鏡下發(fā)橙紅色熒光②酶：辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶。③生物素：（Biotin）④鐵蛋白金等：主要應(yīng)用于免疫電鏡。其他：如同位素（因涉及污染和防護難一般不用）免疫組化技術(shù)應(yīng)用凡是組織細胞內(nèi)具有抗原性的物質(zhì)。哪里有比較好的免疫組化服務(wù)融享生物。山東免疫學免疫組化檢測

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意義編輯

近年來，隨著免疫組織化學技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難得到了明確診斷。在常規(guī)病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可，其在低分化或未分化的鑒別診斷時，準確率可達50%-75%。免疫組織化學的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：

⑴惡性的診斷與鑒別診斷；

⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性的原發(fā)部位；

⑶對某類進行進一步的病理分型；

⑷軟組織的一般需根據(jù)正確的組織學分類，因其種類多、組織形態(tài)相像，有時難以區(qū)分其組織來源，應(yīng)用多種標志進行免疫組化研究對軟組織的診斷是不可缺少的；

⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶，有助于臨床方案的確定，包括手術(shù)范圍的確定。

⑹為臨床提供方案的選擇。

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