1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實(shí)驗(yàn)室,任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法,但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運(yùn)動精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級,第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動、慢速前向運(yùn)動、非前向運(yùn)動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(PR)、非前向運(yùn)動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計(jì)算。第6版手冊強(qiáng)調(diào),精子形態(tài)學(xué)評估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明;全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗(yàn)水平,廣泛應(yīng)用于泌尿科,男性科以及計(jì)劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等。北京快速運(yùn)動精子分析W.H.O 4
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細(xì)胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細(xì)精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時(shí),精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細(xì)胞。八、精液細(xì)胞檢查[正常參考值]白細(xì)胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);紅細(xì)胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細(xì)胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細(xì)胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細(xì)胞,對生殖系*有診斷意義。馬精子分析DAPHamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本,提高工作效率。
五、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子>0.80:**后120分鐘內(nèi)活動力為Ⅲ級以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多,是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活動力下降。六、精子計(jì)數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計(jì)數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2.精液多次未查到精子為無精癥,主要見于睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個月后精液中應(yīng)無精子,否則說明手術(shù)失敗。3.老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。
CASA,即計(jì)算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動和超活化運(yùn)動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運(yùn)動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個精子,結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時(shí),需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動的不同特性。全自動精子分析儀嚴(yán)格按照世界衛(wèi)生組織(WHO)和KRUGER標(biāo)準(zhǔn),并通過ISO9001認(rèn)證。
通過比較進(jìn)行質(zhì)量評估1.室內(nèi)比較是采用同一個標(biāo)本在同一參數(shù)下?經(jīng)CASA多次測定后?應(yīng)用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法對測得數(shù)值進(jìn)行比較。在男科實(shí)驗(yàn)室中對CASA系統(tǒng)的質(zhì)量控制通常使用影像磁帶或完全相同的凍存**標(biāo)本進(jìn)行日間比較。當(dāng)室內(nèi)比較作為結(jié)果質(zhì)量的一種評估時(shí)?計(jì)算機(jī)中數(shù)值的在線獲得是極具優(yōu)勢的。2.室間比較要求標(biāo)本向其他幾個實(shí)驗(yàn)室運(yùn)送文獻(xiàn)中的一些報(bào)道闡述了該方面的經(jīng)驗(yàn)但是運(yùn)動精子是不能在不受限制的條件下運(yùn)輸?shù)膶⑵渲糜谝旱羞\(yùn)送需進(jìn)一步考慮更多的因素(解凍技術(shù)、標(biāo)本的處理等)這些因素會影響活動力參數(shù);到目前為止室間比較的研究還未見滿意報(bào)道;Jorgensen等進(jìn)行了研究嘗試克服實(shí)驗(yàn)室間運(yùn)送解凍標(biāo)本的困難其研究方式是:邀請四個實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員攜帶各自的儀器到同一個地點(diǎn)以各自通常采用的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行精子評估但未見明確的結(jié)論。3.對于精子活力測定CASA系統(tǒng)的測定與直觀評估的比較有文獻(xiàn)進(jìn)行了報(bào)道但結(jié)果并不相同。認(rèn)為直觀評估揭示標(biāo)準(zhǔn)數(shù)值且其差異是由CASA系統(tǒng)的錯誤引起的該觀點(diǎn)是不正確的;無論從理論上還是實(shí)踐中CASA數(shù)值比直觀評估所獲得的數(shù)值更接近于真值;對直線前進(jìn)的精子比例而言這一點(diǎn)是非常正確的。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),擺動性(WOB)?:實(shí)際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動值。北京快速運(yùn)動精子分析W.H.O 4
CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動特性。北京快速運(yùn)動精子分析W.H.O 4
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時(shí)間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時(shí)間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時(shí)間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測精子活動力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。北京快速運(yùn)動精子分析W.H.O 4