紅細胞裂解液
產(chǎn)品說明:
紅細胞裂解液,為10X紅細胞裂解液,經(jīng)過優(yōu)化配方,用于從人或鼠等的血液或標本中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。此溶液中主要有效成分為氯化銨。使在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞或其它有細胞核的細胞。本裂解液經(jīng)過無菌過濾,處理過的血液或細胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。
注意事項:
對于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進行離心棄上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液,并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10分鐘,但通常不宜超過15分鐘,并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續(xù)步驟相同。 細胞的凍存密度一般是多少?北京完全培養(yǎng)基和細胞凍存液
凍存細胞類型:臍血及臍帶組織、外周血、間充質(zhì)干細胞、多能干細胞、組織樣本等
① 用于減輕冷凍和解凍復(fù)蘇期間由溫度引起的分子應(yīng)激反應(yīng)
② 分別以2%、5%或10%USP級的二甲基亞砜(DMSO)預(yù)先配制即用型細胞凍存液
凍存細胞類型:臍血及臍帶組織、外周血和骨髓
① BloodStor®55-5以55%(重量/體積)的DMSO(USP)級、5%(重量/體積)的葡萄糖-40(USP)級和注射液(WFI)級別的水預(yù)先配制
② BloodStor®100含有**(重量/體積)的DMSO(USP級)
吉林hela細胞凍存液是哪些物質(zhì)細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑.
細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開***開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時間一般比較短,不能滿足時間跨度大的實驗項目的需求。且這樣人力和時間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實驗結(jié)果帶來了不穩(wěn)定性。細胞凍存液避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。
細胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。細胞凍存液取對數(shù)成長期的體細胞,除去舊細胞培養(yǎng)液,用PBS清理.杭州新型細胞凍存液配制步驟
無血清細胞凍存液原理.北京完全培養(yǎng)基和細胞凍存液
埃澤思生物細胞凍存液、細胞消化液和胰酶消化溶液三項產(chǎn)品完成醫(yī)療器械分類界定2019年9月20日,埃澤思(福建)生物有限公司向福建省食品藥品監(jiān)督管理局提交三項產(chǎn)品:細胞凍存液、細胞消化液、胰酶消化溶液產(chǎn)品分類界定申請。經(jīng)過**答辯,以及監(jiān)管部門批準,依據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局相關(guān)文件,**終正式將埃澤思生物科技有限公司的細胞凍存液、細胞消化液和胰酶消化溶液三種產(chǎn)品按照醫(yī)療器械管理,批準進行醫(yī)療器械備案。(圖1)以上信息可在中國藥監(jiān)醫(yī)療器械分類系統(tǒng)中進行查詢(圖2,3)。以下將對三項產(chǎn)品進行具體介紹:北京完全培養(yǎng)基和細胞凍存液
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