Q:從新生24h以內(nèi)的SD乳鼠心臟分離的原代心肌細(xì)胞可以傳代嗎?通??梢詡鲙状兀緼1:原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)后是可以傳代的,通常可以穩(wěn)定傳代5-6代左右A2:從新生24h內(nèi)的SD乳鼠心臟分離的原代心肌細(xì)胞可以傳代。通常情況可以傳五代。A3:通常情況下,從新生24小...
細(xì)胞增殖通俗點(diǎn)講,細(xì)胞增殖也就是細(xì)胞分裂,就像我們每個(gè)人的生命起點(diǎn)都是由一個(gè)受精卵不斷的分裂而來,然后形成由非常多的細(xì)胞組成的個(gè)體,當(dāng)然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細(xì)胞出現(xiàn),這就是細(xì)胞增殖。增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖及遺傳的基礎(chǔ)。大家了解細(xì)胞增殖說明了什么...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)(DH0002)一、服務(wù)介紹細(xì)胞轉(zhuǎn)染(Transfection)是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或控制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可以分為兩大類,一類為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,一類為...
原理以慢病毒包裝為例,主要包括3個(gè)質(zhì)粒:質(zhì)粒DNA可以轉(zhuǎn)錄出慢病毒遺傳物質(zhì)(RNA),但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質(zhì)粒,其同時(shí)含有目的基因和報(bào)告基因,psPAX2是可以表達(dá)慢病毒外殼的質(zhì)粒,其表達(dá)產(chǎn)物可通過粘附機(jī)制更易穿過細(xì)胞膜。為慢病毒的膜蛋白質(zhì)...
原理過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系(OverexpressionStableCellLines)的構(gòu)建利用慢病毒轉(zhuǎn)染、電轉(zhuǎn)等技術(shù)手段將特定的基因序列整合到宿主細(xì)胞的染色體上,使得目的基因能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)長期且穩(wěn)定的表達(dá)。用途基因功能研究、免疫/殺傷/增殖等、抗體藥物的活性篩...
細(xì)胞生命的終結(jié)有許多種方式,凋亡只是其中一種,所以要確保自己檢測到的的確是凋亡信號(hào)。上海東寰為您分析細(xì)胞凋亡的檢測方法!細(xì)胞凋亡的檢測方法也有多種,如形態(tài)學(xué)檢測、磷脂酰絲氨酸外翻分析(AnnexinV法)、線粒體膜勢能檢測、DN***斷化檢測、TUNEL法及C...
把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞飄起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入適量(消化前預(yù)估細(xì)胞的數(shù)量,1-2*10E...
細(xì)胞增殖通俗點(diǎn)講,細(xì)胞增殖也就是細(xì)胞分裂,就像我們每個(gè)人的生命起點(diǎn)都是由一個(gè)受精卵不斷的分裂而來,然后形成由非常多的細(xì)胞組成的個(gè)體,當(dāng)然在增殖期間也不斷有衰老和死亡的細(xì)胞出現(xiàn),這就是細(xì)胞增殖。增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖及遺傳的基礎(chǔ)。大家了解細(xì)胞增殖說明了什么...
然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽、核酸藥物、天然產(chǎn)物等。外泌體的抑制作用外泌體水平升高通常與不同類型的惡化相關(guān),一些研究人員希望能通過降低外泌體到正常水平來防止不良預(yù)后。從這個(gè)...
并進(jìn)質(zhì)粒抽提。GAG質(zhì)粒和VSV質(zhì)粒同樣可以轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)菌DH5α中,并進(jìn)行無內(nèi)質(zhì)粒抽提。質(zhì)粒抽提后冷凍于-20℃保存。2、慢病毒包裝1)使用DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng)6cm皿HEK293T至匯合度為70~80%。采用opti-MEM和Lipo3000分別轉(zhuǎn)染含...
由于RNA酶是無處不在的,所以需要加入DEPC使RNA酶失活,阻止RNA的降解。防護(hù)攻略:可滅活各種蛋白質(zhì),是RNA酶的強(qiáng)抑制劑。DEPC是一種潛在的致物質(zhì),在操作中應(yīng)盡量在通風(fēng)的條件下進(jìn)行,并避免接觸皮膚。DEPC毒性并不是很強(qiáng),但吸入的毒性是強(qiáng)的,使用時(shí)戴...
如發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)、組織愈合等。此外,外泌體與疾病的研究表明:外泌體可能在代謝性疾病的出現(xiàn)以及心血管健康中發(fā)揮作用。外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細(xì)胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制之間假定的聯(lián)系提供了新的見解。與研究外泌體在...
注意事項(xiàng)1.病毒包裝的幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)主要包括:細(xì)胞因素、載體系統(tǒng)(盡量使用成熟的商業(yè)化載體系統(tǒng))、構(gòu)建重組的質(zhì)粒正確與否、質(zhì)粒抽提純化情況、包裝轉(zhuǎn)染控制(24、48小時(shí)的細(xì)胞及熒光狀態(tài)判斷)、目的基因?qū)Σ《景b影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等都會(huì)影響到是否...
把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞漂起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,吹打重懸細(xì)胞用細(xì)胞計(jì)...
液體活檢三大標(biāo)志物之一的外泌體(exosomes),近幾年研究熱度持續(xù)攀升。有關(guān)外泌體載藥、診斷、免疫療法等方向的文章陸續(xù)發(fā)表在Science、Nature等各大期刊上,外泌體已成為生命科學(xué)/基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的一大熱點(diǎn)。外泌體的功能外泌體可能作為細(xì)胞之間物質(zhì)和信號(hào)...
液體活檢三大標(biāo)志物之一的外泌體(exosomes),近幾年研究熱度持續(xù)攀升。有關(guān)外泌體載藥、診斷、免疫療法等方向的文章陸續(xù)發(fā)表在Science、Nature等各大期刊上,外泌體已成為生命科學(xué)/基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的一大熱點(diǎn)。外泌體的功能外泌體可能作為細(xì)胞之間物質(zhì)和信號(hào)...
實(shí)驗(yàn)介紹細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwel小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上下層培養(yǎng)液以聚磚酸甜膜相隔,將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸脂膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)跑,應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸脂膜,就可以進(jìn)...
如發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)、組織愈合等。此外,外泌體與疾病的研究表明:外泌體可能在代謝性疾病的出現(xiàn)以及心血管健康中發(fā)揮作用。外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細(xì)胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)制之間假定的聯(lián)系提供了新的見解。與研究外泌體在...
1.甲醛(HCOH)毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:免疫組化實(shí)驗(yàn)中,取材后的組織或細(xì)胞需立刻投于固定劑中,使組織和細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固,終止內(nèi)源性或外源性酶反應(yīng),防止組織自溶或異溶,以保持原有結(jié)構(gòu)和形態(tài)。防護(hù)攻略:甲醛(福爾馬林)有很大的毒性并易揮發(fā),也是一種致劑(不...
一.細(xì)胞復(fù)蘇1、提前準(zhǔn)備完全培養(yǎng)基并預(yù)熱至37℃(可以放至在水浴或培養(yǎng)箱中進(jìn)行預(yù)熱,需要多少預(yù)熱多少,反復(fù)預(yù)熱會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基失活);用清洗潔凈的燒杯或其他合適容器裝有適量超純水,然后放入37-38℃水浴鍋中預(yù)熱至37℃(至少需30min);把所需耗材和其他物品放...
細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程,而是主動(dòng)過程,它涉及一系列基因的ji活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用,它并不是bing理?xiàng)l件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡過程。上海東寰為您分享細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別。細(xì)胞凋亡...
細(xì)胞周期和凋亡技術(shù)服務(wù)(DH0003)一、服務(wù)介紹細(xì)胞周期(CellCycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期:即DNA合成前期(G1期)、...
同時(shí)還有生殖、發(fā)育毒性。可通過皮膚吸收及呼吸道進(jìn)入人體,因此,在搬運(yùn)和使用中必須穿戴好防護(hù)用具,如防毒服,防毒口罩及防毒手套等。毒性級(jí)別:★★★★實(shí)驗(yàn)場景:用于催化過硫酸銨產(chǎn)生自由基,從而加速丙烯酰胺凝膠的聚合。防護(hù)攻略:強(qiáng)神經(jīng)毒性,防止誤吸,操作時(shí)快速,存放...
操作時(shí)戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。(又稱為二甲基亞砜)毒性級(jí)別:★★★實(shí)驗(yàn)場景:常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的凍存,它可以破壞氫鍵的形成,從而防止冰晶的形成對(duì)細(xì)胞造成傷害,也是實(shí)驗(yàn)室中比較常用的有機(jī)溶劑。防護(hù)攻略:存在嚴(yán)重的毒性作用,具有血管毒性和肝腎...
液體活檢三大標(biāo)志物之一的外泌體(exosomes),近幾年研究熱度持續(xù)攀升。有關(guān)外泌體載藥、診斷、免疫療法等方向的文章陸續(xù)發(fā)表在Science、Nature等各大期刊上,外泌體已成為生命科學(xué)/基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的一大熱點(diǎn)。外泌體的功能外泌體可能作為細(xì)胞之間物質(zhì)和信號(hào)...
把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察,如大部分細(xì)胞變圓,立即移除胰酶消化液(如大部分細(xì)胞漂起,可不移除胰酶消化液),加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞,使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液,離心,小心移除上清;3、加入5ml預(yù)熱完全培養(yǎng)基,吹打重懸細(xì)胞用細(xì)胞計(jì)...
細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過程,而是主動(dòng)過程,它涉及一系列基因的ji活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用,它并不是bing理?xiàng)l件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡過程。上海東寰為您分享細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別。細(xì)胞凋亡...
流式細(xì)胞檢測工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測得多個(gè)參數(shù),具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),是當(dāng)代先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一,下面就由上海東寰給大家簡要...
細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。上海東寰為您分享有絲分裂的周期變化。有絲分裂的周期變化細(xì)胞分裂期在細(xì)胞分裂期,很...
上期我們主要講解了細(xì)胞凋亡的早期檢測方法,這期主要講解一下細(xì)胞凋亡晚期中,核酸內(nèi)切酶(某些Caspase的底物)在核小體之間剪切核DNA,產(chǎn)生大量長度在180-200bp的DNA的片段。1、凋亡DNALadder檢測試劑盒細(xì)胞經(jīng)處理后,采用常規(guī)方法分離提純DN...