PCR儀是利用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù),在體外對特定DNA片段進行大量擴增的儀器。其原理是通過高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進行,使目的DNA得以迅速擴增。具體過程如下:高溫變性:將待擴增的DNA雙鏈在高溫(90-95℃)下解鏈,形成單鏈DNA模板。低溫退火:降低溫度(一般為50-65℃),使引物與單鏈DNA模板特異性結(jié)合。適溫延伸:在DNA聚合酶的作用下,以引物為起始點,在適宜溫度(一般為72℃左右)下,以dNTP為原料,沿著模板鏈合成新的DNA鏈。柏恒RePure系列PCR儀進行PCR擴增,能夠獲得高質(zhì)量的擴增產(chǎn)物,確保實驗結(jié)果的可靠性和準確性。江蘇QPCR基因擴增儀PCR儀檢測
實時熒光定量 PCR 儀(qPCR 儀)的使用需嚴格遵循操作流程,以確保實驗結(jié)果的準確性和重復(fù)性。實驗前準備試劑與樣本準備:根據(jù)實驗需求配制qPCR反應(yīng)體系(通常包括模板DNA/RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、引物、探針/熒光染料、qPCRMix酶、無菌水等),需在冰上操作,避免酶失活。模板:確保核酸提取純度(OD260/280在1.8-2.0之間),避免蛋白、鹽類等雜質(zhì)污染。引物/探針:需驗證特異性,避免引物二聚體或非特異性結(jié)合。儀器與耗材檢查:檢查qPCR儀電源、觸摸屏/軟件是否正常啟動,清潔樣品槽(去除灰塵或液滴,避免影響溫度傳導(dǎo))。準備無菌的PCR管或96孔板(建議使用光學(xué)級耗材,確保熒光信號穿透性)、移液器(校準合格)、濾芯吸頭(防止交叉污染)。定量基因擴增儀PCR儀要多少錢RePure-T的梯度溫控技術(shù)能夠在各個樣本槽之間精確地設(shè)置不同的溫度。
PCR 儀的維護與注意事項:日常維護:定期清潔反應(yīng)模塊,去除殘留試劑(如礦物油、PCR 產(chǎn)物),避免污染。校準溫度:使用標準溫度計驗證控溫精度,每年至少 1 次。操作注意:配置反應(yīng)體系時需在冰上進行,防止引物或酶提前活化。避免頻繁開關(guān)儀器,減少溫控模塊損耗。實驗后及時進行模塊消毒(如用 75% 乙醇擦拭),防止交叉污染。PCR 儀的發(fā)展趨勢:便攜化與集成化:微流控芯片 PCR 儀將反應(yīng)體系微型化,可實現(xiàn) “樣本進 - 結(jié)果出” 的即時檢測(如 POCT 設(shè)備)。高通量與自動化:結(jié)合機器人工作站,實現(xiàn)從樣本提取到 PCR 擴增的全流程自動化,適用于大規(guī)模篩查。多功能整合:如與測序儀聯(lián)用,實現(xiàn) “擴增 - 測序” 一體化,縮短基因分析周期。
醫(yī)療與臨床診斷:疾病檢測的 “金標準”1. 病原體快速檢測場景:病毒性疾病:(擴增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 檢測)、HPV 分型(L1 基因擴增);細菌性疾?。航Y(jié)核分枝桿菌(IS6110 基因檢測)、淋球菌(隱蔽質(zhì)?;驍U增)。技術(shù)價值:相比傳統(tǒng)培養(yǎng)法,PCR 可縮短檢測時間(如結(jié)核檢測從 2-4 周縮短至 4 小時),且適用于微量樣本(如腦脊液、拭子)。設(shè)備需求:高通量 96 孔板 PCR 儀,部分場景需搭配核酸提取儀實現(xiàn)自動化檢測。2. 遺傳疾病篩查場景:產(chǎn)前診斷(如唐氏綜合征 21 號染色體三體檢測)、新生兒遺傳?。倚岳w維化基因 F508del 突變檢測)。技術(shù)價值:通過擴增目標突變位點,結(jié)合測序或酶切分析,實現(xiàn)疾病的早期確診(如脊髓性肌萎縮癥 SMN1 基因缺失檢測)。RePure-(D)B在同一次實驗中測試多個不同溫度下的反應(yīng)效果,提高實驗的成功率。
溫度與反應(yīng)體系控制溫度準確性:定期校準儀器(由專業(yè)人員進行),確保變性、退火溫度精細(偏差超過 ±0.5℃會影響結(jié)果)。體系一致性:加樣時確保各孔反應(yīng)體積一致(誤差≤1μL),避免因體積差異導(dǎo)致 Ct 值偏差。避免氣泡:加樣后若有氣泡,需輕輕敲擊板壁或離心去除,否則氣泡會干擾熒光信號采集。3. 試劑與樣本處理酶的保存:qPCR Mix 需 - 20℃冷凍保存,使用時冰上融化,輕輕混勻(勿震蕩,防止酶變性)。模板質(zhì)量:避免模板中含 EDTA、SDS 等抑制劑,若樣本濃度過低,可適當增加模板量(但需注意體積占比,避免影響反應(yīng)體系)。RePure系列PCR儀采用了梯度溫控技術(shù),能夠在實驗中準確調(diào)節(jié)溫度梯度,可以輕松地優(yōu)化PCR反應(yīng)條件。QPCR基因擴增儀PCR儀經(jīng)銷商
RePure-A的技術(shù)實力在不斷更新,科研人員在復(fù)雜研究中能獲得可重復(fù)、可靠的實驗數(shù)據(jù),從而加快科研進程。江蘇QPCR基因擴增儀PCR儀檢測
96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過 96 孔反應(yīng)板實現(xiàn)一次性處理 96 個樣本的基因擴增,適用于高通量檢測場景。其設(shè)計**是通過精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司法等領(lǐng)域。臨床與醫(yī)學(xué)檢測大規(guī)模病原體篩查應(yīng)用:、流感病毒、HPV 等傳染病的批量檢測(如醫(yī)院檢驗科、疾控中心)。案例:**期間,96 孔 PCR 儀配合自動化移液工作站,單日可完成數(shù)千份樣本的核酸提取與擴增。遺傳疾病批量診斷應(yīng)用:同時檢測多個樣本的致病基因突變(如地中海貧血、脊髓性肌萎縮癥)。江蘇QPCR基因擴增儀PCR儀檢測